| [Члан (365WT)]одговори [Кинески ] | Време :2018-02-22 | Са развојем високе перформансе техника одвајања течна (ХПЛЦ) и Орбитрап (Орбитрап) масене спектрометрије, течна хроматографија са масеном спектрометријом (ЛЦ-МС / МС) су тренутно доминантна технологија у анализи Протеомика. Основни корак идентификовања протеина (боттом-уп) се генерално приказан десно: узорак прикупљени након дигестије укупног екстракта протеина → резања → протеина је полипептидни фрагмент одвајање ХПЛЦ фракције → дубље у поља јонизације МС → добијања сваког јона маса за пуњење МС Однос и максимална информација → софтвер за израчунавање састава аминокиселина → претраживање базе података за добијање квалитативних и секвенцијалних информација о протеинима.
Засновано Куантитативе протеомикане ЛЦ-МС / МС техника се обично подељени у две врсте нису означавање и методе обележавања најчешће коришћених типова етикетирања морају :. ИТРАК (ин витро), ТМТ (ин витро), СИЛАЦ (ин виво) на основу три врсте изотопа начин етикете семиквантитативно.У најчешће коришћена иТРАК квантитативни Протеомика Пример: иТРАК се састоји од 8 (113/114/115/116/117/118/119/121) изотопа налепнице композиција, ензимски 8 случајеви су различити узорци током експеримента → то полипептидни фрагменти су означени изотопне таг → 8 врста из осам случајева добре маркер полипептид узорка смеше у једном случају → укупном узорку у ЛЦ-МС / МС систем анализе МС → dve фазе стање гроуп иТРАК неутрал губитак јавља при ниским стварајући мноштво извештаја ион масовну регион → област пика је израчунат за сваки репортер јона, како би се добило релативном вишку истих показатеља пептидних → пондерисане разлике између различитих узорака обрачунава се добије релативно изобиље пептида укупног протеина квантитативна вредности..
ИТРАК технологија представља ин витро технологије обележавања је тренутно најраспрострањенији семи-квантитативна протеомикане детекција, једноставна операција, висока стабилност података. Међутим, за износ од ограничења изотопа обележавање, велики број узорака током експеримента да Лабел Фрее и ДИА, као представник не етикетирање технологије квантитативни протеомика има предност детаљније информације, погледајте под-странице.
хттп://ввв.ваиенбио.цом/данбаизхизукуе-316395-0-итем-651757.хтмл |
|
